ARCHIVAGE THEMATIQUE DES MESSAGES DU FORUM HYGIENE |
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Pages d’archives connexes Méthodes d'analyse concernant Legionella
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Les méthodes d’analyse PCR et ELISA |
dimanche 8 octobre 2000 17:44
Applied and
environmental microbiology 10-00 Improved Template Preparation for
PCR-Based Assays for Detection of Food-Borne Bacterial Pathogens
http://aem.asm.org/cgi/content/abstract/66/10/4539
PCR for
Detection of Shigella spp. in Mayonnaise
http://aem.asm.org/cgi/content/full/64/4/1242?maxtoshow=&HITS=10&hits=10&RESULTFORMAT=&fulltext=%22salmonella+panama%22&searchid=971013436804_6220&stored_search=&FIRSTINDEX=&journalcode=aem
ou
http://aem.asm.org/cgi/reprint/64/4/1242.pdf
mardi 14 mai 2002 22:03
Food Safety Magazine
(via FS-NET) Dec-Jan 2002 Au sommaire :
INSIDE
MICROBIOLOGY: AN INSIDER'S VIEW INTO THE USE OF PCR IN THE FOOD
INDUSTRY
http://archives.foodsafetynetwork.ca/fsnet/2002/5-2002/fsnet_may_14.htm
jeudi 16 mai 2002 20:28
PCR.dk - An
European research project for standardization of Polymerase Chain
Reaction (PCR) for detection of food-borne
pathogens
http://www.pcr.dk/
vendredi 9 août 2002 08:17
VETSCITE 08/08/02 Software to design real time PCR probes
http://www.vetscite.org/publish/items/000720/
lundi 9 décembre 2002 08:14
Poultry International, June 1999 PCR, An Increasingly Used
Diagnostic
Tool
http://www.wattnet.com/Archives/Docs/699pib.pdf?CFID=25710&CFTOKEN=74030876
vendredi 9 janvier 2004 09:27
FOOD MICROBIOLOGY FEV 2004 Rapid detection of Salmonella from
vegetable rinse-water using real-time
PCR
http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6WFP-49XWVF1-B&_user=10&_handle=W-WA-A-A-AD-MsSAYZA-UUW-AUDBDEYYWZ-AYUVAUEAA-AD-U&_fmt=full&_coverDate=02%2F29%2F2004&_rdoc=10&_orig=browse&_srch=%23toc%236800%232004%23999789998%23469321!&_cdi=6800&view=c&_acct=C000050221&_version=1&_urlVersion=0&_userid=10&md5=8c0bbf94111739b9bd572a2e09c4a9b8
mercredi 4 février 2004 09:13
REVIEWS IN BIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY BY THE MOROCCAN SOCIETY OF
BIOLOGY IN CANADA
La PCR en temps réel: principes et
applications
http://www.collegeahuntsic.qc.ca/pagesdept/biologie/Programmes/Biotechnologies/210-113-AH/PCR.pdf
vendredi 6 février 2004 12:14
INTERNATL MICROBIOL 2000 Rapid identification of Salmonella
typhimurium, S. enteritidis and S. virchow isolates by Polymerase
Chain Reaction based fingerprinting
methods
http://www.im.microbios.org/09march00/07%20Bennasar.pdf
INTERNATL
MICROBIOL 2000 Detection of Salmonella in food samples by the
combination of immunomagnetic separation and PCR
assay
http://www.im.microbios.org/12december00/05%20Jenikova.pdf
LUNDI 06 DECEMBRE 2004
ANNALES DE MEDECINE
VETERINAIRE 2004 Détection des contaminants viraux sanguins
chez l’homme par PCR., Ann. Med. Vet., 2004, 148 (S), pages
42-46
http://www.facmv.ulg.ac.be/amv/articles/2004_148_S_13.pdf
MERCREDI 23 FEVRIER 2005
Emerging
Infectious Diseases journal Vol. 11, No. 3, March 2005, is
now
available on the Web.
http://www.cdc.gov/ncidod/EID/index.htm
Au sommaire:
Rapid Identification of Emerging Pathogens, R.
Sampath et al.
http://www.cdc.gov/ncidod/EID/vol11no03/04-0629.htm
MERCREDI 10 AOUT 2005
DOSSIER
PCR
___________
FOOD NAVIGATOR 09/08/05 Technique detects
wide array of pathogens
(PCR)
http://www.foodnavigator.com/news/news-ng.asp?n=61786-technique-detects-wide
Autres informations concernant la réaction de
polymérisation en chaîne (PCR) :
- Explications
générales et normes
WIKIPEDIA - Réaction
en chaîne par
polymérase
http://fr.wikipedia.org/wiki/R%C3%A9action_en_cha%C3%AEne_par_polym%C3%A9rase
WIKIPEDIA - Techniques de biologie
moléculaire
http://fr.wikipedia.org/wiki/Techniques_de_biologie_mol%C3%A9culaire
ENS - Introduction à la Biologie
Moléculaire
http://www.lps.ens.fr/~vincent/courdea/my_biomol.pdf
Reviews in Biology and Biotechnology Vol.2, No 2, December 2002.
pp.2-11 La PCR en temps réel: principes et
applications
http://www.collegeahuntsic.qc.ca/pagesdept/biologie/Programmes/Biotechnologies/210-113-AH/PCR.pdf
LABORATOIRE Marcel MERIEUX 16/12/04 La PCR en temps réel
(Real-Time
PCR)
http://www.biospeonline.com/download/FC_2004_2005/PCR_DENOYEL.pdf
DNA from the Beginning
http://www.dnaftb.org/dnaftb/
PCR and multiplex PCR
guide
http://info.med.yale.edu/genetics/ward/tavi/Guide.html
The World Famous PCR Jump Station: Polymerase Chain
Reaction
http://www.highveld.com/pages/pcr.html
UNIVERSITE DE LYON - LES TECHNIQUES DE BASE DE LA BIOLOGIE
MOLÉCULAIRE
http://spiral.univ-lyon1.fr/polycops/BiologieMoleculaire/BiologieMoleculaire-5.html
INSTITUT LOUIS MALARDE - La PCR est une technique de biologie
moléculaire mise au point en 1985, par Karry Mullis. C'est une
technique d'amplification génique, c'est-à-dire qu'elle
permet de repérer un fragment d'ADN ou de gène précis,
même présent en quantité infime dans un mélange,
puis de le multiplier rapidement.
http://www.ilm.pf/PCR-texte.html
INSTITUT LOUIS MALARDE - La PCR
moustiques
http://www.ilm.pf/fi-pcr-moustiques.html
JORF 15/06/05 Avis relatif à l'homologation et à
l'annulation de
normes
http://www.legifrance.gouv.fr/WAspad/UnTexteDeJorf?numjo=INDI0510029V
En application du décret n° 84-74 du 26 janvier 1984
modifié, en l'absence d'opposition du délégué
interministériel aux normes, le conseil d'administration de
l'Association française de normalisation, par décision
n° 2005-22 du 20 mai 2005, a prononcé :
A. -
L'homologation, pour prendre effet à compter du 20 juin 2005,
des 37 normes françaises suivantes : AGROALIMENTAIRE NF EN ISO
22174. - Microbiologie des
aliments. - Réaction de
polymérisation en chaîne (PCR) pour la recherche de
micro-organismes pathogènes dans les aliments. - Exigences
générales et définitions (indice de classement :
V08-410).
- Applications en alimentation
FOOD NAVIGATOR
24/06/03 Detecting pathogens in dry dairy ingredients DuPont Qualicon
has a new addition to its BAX system line of diagnostic tests - the
BAX system PCR assay for detecting Enterobacter sakazakii in infant
formula, dry dairy and soy
ingredients....
http://www.foodnavigator.com/news/news.asp?id=7866
INTERNATL MICROBIOL 2000 Detection of Salmonella in food samples
by the combination of immunomagnetic separation and PCR
assay
http://www.im.microbios.org/12december00/05%20Jenikova.pdf
Laboratory and Epidemiology Communications 24/07/01 Sensitive
Detection of Cryptosporidium Oocysts in Environmental Water Samples
by Reverse Transcription-
PCR
http://www.nih.go.jp/JJID/LEC-110.html
Int J Syst Evol Microbiol Janvier 1998 Comparison of PCR-based DNA
fingerprinting techniques for the identification of Listeria species
and their use for atypical Listeria
isolates
http://ijs.sgmjournals.org/cgi/content/abstract/48/1/127
Int J Syst Evol Microbiol Janvier 1998 Differentiation and species
identification of yeasts
using
http://ijs.sgmjournals.org/cgi/content/abstract/48/1/279
University of Helsinki, Academic Dissertation, June 1999.
Detection, Quantification and Characterization of Food Related
Microorganisms Using
Molecular and Physiological Methods
Vesa
Mäntynen
http://ethesis.helsinki.fi/julkaisut/maa/skemi/vk/mantynen/
PCR.dk - An European research project for standardization of
Polymerase Chain Reaction (PCR) for detection of food-borne
pathogens
http://www.pcr.dk/
- Applications en médecine humaine
Université
Catholique de Louvain - Apport de la PCR en temps réel en
maladies infectieuses - Séminaire de Pathologie Infectieuse -
25 octobre
2001
http://www.md.ucl.ac.be/seminfect/dia-stainier-25-10-01/
BIOLOGICAL RESEARCH v.35 n.3-4 Santiago 2002 Characterization by
PCR of Vibrio parahaemolyticus isolates collected during the
1997-1998 Chilean
outbreak
http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716-97602002000300017&lng=es&nrm=iso&tlng=en
BIOLOGICAL RESEARCH v.35 n.3-4 Santiago 2002 Characterization by
PCR of Vibrio parahaemolyticus isolates collected during the
1997-1998 Chilean
outbreak
http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716-97602002000300017&lng=es&nrm=iso&tlng=en
ANNALS OF SAUDI MEDICINE MAI/JUILLET 2000 Evaluation of PCR,
Culture and Serology for the Diagnosis of Acute Human
Brucellosis
http://www.kfshrc.edu.sa/annals/html/toc203_204.html
BMC INFECTIOUS DISEASE 28/04/03 Diagnosis of recent and relapsed
cases of human brucellosis by PCR assay [résumé –
article complet]
http://www.biomedcentral.com/1471-2180/1/25
http://www.biomedcentral.com/content/pdf/1471-2180-1-25.pdf
EUROFINS 06/10/03 Eurofins lance le premier test de criblage PCR
multi-
allergènes
http://www.eurofins.fr/actualites/communiques_de_presse/2003_10_06.asp
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY Janvier 2003 Au sommaire
:
Detection and Differentiation of Entamoeba histolytica and
Entamoeba dispar Isolates in Clinical Samples by PCR and
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay
Evaluation of 11 PCR Assays for
Species-Level Identification of Campylobacter jejuni and
Campylobacter coli
Development and Evaluation of a
PCR-Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for
Diagnosis of Human
Brucellosis
http://jcm.asm.org/content/vol41/issue1/index.shtml
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY Mai 2003 Au sommaire :
Multiplex
PCR for Detection of Three Plasmid-Borne Genes of Enteroaggregative
Escherichia coli
Strains
http://jcm.asm.org/content/vol41/issue5/index.shtml
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY Février 2002 Au sommaire :
Detection of Pathogenic Yersinia enterocolitica by a Rapid and
Sensitive Duplex PCR
Assay
http://jcm.asm.org/content/vol40/issue2/index.shtml
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY Octobre 2001 Au sommaire :
Molecular Analysis of a Hospital Cafeteria-Associated Salmonellosis
Outbreak Using Modified
Repetitive Element PCR
Fingerprinting
http://jcm.asm.org/content/vol39/issue10/index.shtml
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY Décembre 2001 Au sommaire
: Detection of Pathogenic Yersinia enterocolitica by a Rapid and
Sensitive Duplex PCR
Assay
http://jcm.asm.org/content/vol39/issue12/index.shtml
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY Juin 2002 Au sommaire :
Rapid
Detection and Quantification of RNA of Ebola and Marburg Viruses,
Lassa
Virus, Crimean-Congo Hemorrhagic Fever Virus, Rift Valley
Fever Virus, Dengue
Virus, and Yellow Fever Virus by Real-Time
Reverse
Transcription-PCR
http://jcm.asm.org/content/vol40/issue6/index.shtml
Emerging Infectious Diseases journal Vol. 11, No. 3, March 2005,
Rapid Identification of Emerging Pathogens, R. Sampath et
al.
http://www.cdc.gov/ncidod/EID/vol11no03/04-0629.htm
CDC - Traditional and Molecular Techniques for the Study of
Emerging Bacterial Diseases: One Laboratory's Perspective?
http://www.cdc.gov/ncidod/EID/vol8no2/01-0141.htm
MICROBIOLOGY TODAY FEVRIER 2001 The use of molecular techniques to
detect antimicrobial resistance in clinical bacterial isolates
[Acrobat
PDF]
http://www.socgenmicrobiol.org.uk/pubs/micro_today/pdf/020105.pdf
- Applications en pathologie animale
ADIA NEWS DECEMBRE
2002 Les prélèvements destinés à la PCR
http://www.adiagene.com/liens/adianews6.pdf
ADIA NEWS SEPTEMBRE 2002 La PCR en temps réel et le diagnostic vétérinaire
http://www.adiagene.com/liens/adianews5.pdf
ADIA NEWS - Le diagnostic et le suivi de la maladie des muqueuses : Intérêt de la RT-PCR, méthode de détection du génome vir
http://www.adiagene.com/liens/adianews5.pdf
ADIA NEWS SEPTEMBRE 2001 DOSSIER SPECIAL ACTINOBACILLOSE
http://www.adiagene.com/liens/adianews2.pdf
ADIA NEWS AVRIL 2001 Adiagène était présent
en mars dernier à NANTES pour le rendez vous annuel
du
monde de la recherche avicole. L'occasion de présenter, en
collaboration avec le laboratoire Labofarm, de nouvelles applications
de la PCR pour l'aide à
l'assainissement des élevages.
http://www.adiagene.com/liens/adianews1.pdf
ADIA NEWS JUIN 2003 Le diagnostic du BVD - Cas particulier de la PCR
http://www.adiagene.com/adiavetbvd.html
ADIA NEWS DECEMBRE 2003 ADIAPURE OPTIMISE LES PERFORMANCES DE LA PCR PARATUBERCULOSE
http://www.adiagene.com/liens/adianews8.pdf
ADIA NEWS JUIN 2004 PCR Coxiella burnetii et fièvre Q
http://www.adiagene.com/adiavetcox.html
INRA RENNES 2004 Quantification du génome du circovirus
porcin de type 2 (PCV2) par PCR en temps réel et corrélation
avec la maladie d'amaigrissement du
porcelet
(MAP).
http://www.rennes.inra.fr/umrvp/jrp/2004/04txtSante/05s.pdf
ANNALES DE MEDECINE VETERINAIRE 2004 Au sommaire:
Détection
des contaminants viraux sanguins chez l'homme par PCR., Ann.
Med.
Vet., 2004, 148 (S), pages
42-46
http://www.facmv.ulg.ac.be/amv/resultsearch.php?type=index&num=21
The Society for Veterinary Epidemiology and Preventive Medicine -
Sélection de fiches techniques (illustrées en 1 à
2 pages) : Detection of Mycoplasma
hyopneumoniae in porcine nasal
swabs using real-time PCR.
http://www.svepm.org.uk/posters/2004/Zeeh.zip
FDA VETERINARIAN JAN/FEV 2004 CVM Scientists Develop PCR Test to
Determine
Source of Animal Products in Feed, Pet
Food
http://www.fda.gov/cvm/Jan-Feb04Vet.htm
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY Janvier 2003 Rapid Detection of
Classical Swine Fever Virus by a Portable Real-Time Reverse
Transcriptase PCR
Assay
http://jcm.asm.org/content/vol41/issue1/index.shtml
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY Juillet 2001 Development of a
Rapid and Sensitive Test for Identification of Major Pathogens in
Bovine Mastitis by
PCR
http://jcm.asm.org/content/vol39/issue7/index.shtml
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY Avril 2002 Au sommaire :
Detection by Reverse Transcription-PCR and Genetic Characterization
of Field Isolates of Swine
Hepatitis E Virus from Pigs in
Different Geographic Regions of the United
States
http://jcm.asm.org/content/vol40/issue4/index.shtml
INT-RES 05/12/01 Detection of infectious salmon anaemia virus
(ISAV) by RT-PCR after cohabitant exposure in Atlantic salmon Salmo
salar
http://www.int-res.com/articles/dao/47/d047p175.pdf
Poultry International, June 1999 PCR, An Increasingly Used
Diagnostic
Tool
http://www.wattnet.com/Archives/Docs/699pib.pdf?CFID=25710&CFTOKEN=74030876
RECOMBINOMICS 12/07/05 H5 in Philippines Low Pathogenic By PCR
(07/12/05)
http://www.recombinomics.com/News/07120501/H5_Philippines_PCR.html
- Applications en pathologies végétales et
biotechnologie
Applied and Environmental Microbiology June
2000 Detection of Pseudomonas savastanoi pv. savastanoi in Olive
Plants by Enrichment and
PCR
http://aem.asm.org/cgi/content/full/66/6/2673
SMART CYCLER Août 2001 Real-time fluorescent PCR detection
of fungal plant pathogens using the Smart
Cycler
http://www.cepheid.com/Sites/cepheid/litpdfs/fungal_plant_pathogens.pdf
Journal of Biological Sciences 5(3): 283-288, 2005 Determination
of cryIAb and cryIAc Copy Number in Transgenic Basmati 370 Rice
(Oryza sativa L.) Plants Using
Real-time PCR and its Comparison
with Southern
Blot
http://www.ansinet.org/fulltext/jbs/jbs53283-288.pdf
STATION FEDERALE DE RECHERCHES EN PRODUCTION ANIMALE 05/06/01
MÉTHODE D'ESSAI - Organismes génétiquement
modifiés - Recherche quantitative du promoteur 35S dans les
aliments pour animaux par la technique de polymerase chain reaction
directe (real-time
PCR)
http://www.sar.admin.ch/rap/fr/fodder/gvo_methode_Juni01.pdf
MERCREDI 30 NOVEMBRE 2005
JAMAICA
INFORMATION 29/11/05 Lab Technicians to Benefit from Training in
Elisa
Technique
http://www.jis.gov.jm/health/html/20051127T120000-0500_7467_JIS_LAB_TECHNICIANS_TO_BENEFIT_FROM_TRAINING_IN_ELISA_TECHNIQUE.asp
elodie PERRIER Tue, 10 Jan 2006 18:16:12 +0100
(CET)
Est-ce que quelqu'un pourrais me donner une
indication de prix (et du labo) pour faire une analyse Elisa ou
PCR.
Quelle est la différence entre ces deux méthodes,
y'en a t'il 1 à me conseiller.
Christophe LENTILLON Tue, 10 Jan 2006 18:55:36 +0100
Que
recherchez vous à identifier et sur quel support? (dans l'eau
ou contrôle de surface?)
Elkastalani MULTICOS Tue, 10 Jan 2006 18:54:00 +0100
(Paris, Madrid)
I. Analyse ELISA (Enzyme Linked
Immuno Sorbent Assay) – détection immunoenzymatique des
protéines de l’enveloppe des virus.
1 Prise
d’échantillon sur un sarment aoûté de
vigne.
2 Ecrasement du tissu végétal analysé
par une presse à genouillère.
3 Broyage du
tissu par un broyeur à billes.
4 Paillasse de
manipulation de réactifs avec un plan de plaque et des
plaques.
5 Dépôt de réactifs dans une
plaque.
6 Lecteur de plaques – spectrophotomètre
à 405 nm.
7 Résultat d’analyse :
plaque contenant des témoins et quelques échantillons
dont certains sont atteints par le pathogène recherché
(coloration jaune avec une intensité variable selon le degré
de contamination).
II. Analyse PCR (Polymerase Chain
Reaction) – détection par amplification de fragments
spécifiques de génome (ADN ou ARN) du pathogène
(sélection sanitaire) ou de la plante (cas de la sélection
clonale).
1 Prise d’échantillon sur une
feuille de vigne présentant des symptômes de maladie. 2
Distribution du tampon de broyage sous une hotte d’aspiration.
3 Broyage fin du tissu prélevé par un
broyeur à billes.
4 Extraction de l’ADN par
centrifugation.
5 Dépôt de l’ADN
extrait et d’un mix réactionnel dans une microplaque
PCR.
6 Amplification des fragments de l’ADN dans un
thermocycleur.
7 Equipement pour l’électrophorèse
et mélange de fragments amplifiés de l’ADN avec
une substance colorante.
8 Trempage et agitations d’un
gel d’agarose contenant les amplifiats après
l’électrophorèse.
9 Révélation
des bandes après l’illumination sous UV.
EL
KASTALANI RABII
B. AIME Tue, 10 Jan 2006 20:08:32 +0100
Tout
dépend de la matrice et de ce que vous recherchez. Avez vous
un exemple à donner ?
Cd
elodie PERRIER Thu, 12 Jan 2006 09:05:57 +0100 (CET)
Je
souhaite utiliser ce test sur des eaux de rinçage du nettoyage
après une fabrication de produits (charcuterie) avec une
présence d'allergènes (oeuf, lait, moutarde). Celà
me permettrait de voir si mon nettoyage est suffisament efficace pour
éliminer les traces d'allergènes.
LUNDI
06 FEVRIER 2006
EFFECT MEASURE 04/02/06 New CDC
test: what is
RT-PCR?
http://effectmeasure.blogspot.com/2006/02/new-cdc-test-what-is-rt-pcr.html
MARDI 07 FEVRIER 2006
INERIS FEV
2005 INFO SANTE ENVIRONNEMENT INTERIEUR. Au
sommaire:
http://rsein.ineris.fr/bullinfo/bulletinpdf/bulletin_rsein_11.pdf
Analyse de la contamination fongique de la poussière de maison au moyen de la PCR quantitative
MARDI 21 FEVRIER 2006
CNW 20/02/06
Warnex first to launch quantitative PCR test for food
testing
http://www.newswire.ca/en/releases/archive/February2006/20/c4021.html
MARDI 21 MARS 2006
LABORATORY
TALK 21/03/06 Quantitative PCR test for food testing
Warnex has
announced the launch of a quantitative test for Campylobacter for use
with the real-time PCR-based Warnex rapid pathogen detection
system
http://www.laboratorytalk.com/news/wan/wan100.html
VENDREDI 21 JUILLET 2006
FARMSCAPE
20/07/06 Molecular Methods for Detecting Food Borne Pathogens
Replacing Methods Currently Used.
http://www.farmscape.com/f2ShowScript.aspx?i=22089&q=Molecular+Methods+for+Detecting+Food+Borne+Pathogens+Replacing+Methods+Currently+Used.
MERCREDI 09 AOUT 2006
FARMSCAPE
08/08/06 Molecular Detection Makes Identification of Foodborne
Pathogens Faster, Easier and More Reliable
http://www.farmscape.com/f2ShowScript.aspx?i=22104&q=Molecular+Detection+Makes+Identification+of+Foodborne+Pathogens+Faster%2c+Easier+and+More+Reliable
VENDREDI 16 MARS 2007
MED VET NET -
Project Reports. Au
sommaire:
http://www.medvetnet.org/cms/templates/doc.php?id=117
WP10 - Food-PCR
LUNDI 28 MAI 2007
BIBLIOTHEQUE FUSAGX - 2000 - Au
sommaire:
L'authentification rapide des poulets de chair sous
label : distinction entre poulets issus de souches à
croissance lente ou rapide par la spectrométrie dans le proche
infrarouge
http://www.bib.fsagx.ac.be/library/base/content/v4n4.html
MARDI 29 MAI 2007
ENSA AGADIR - Cours
en ligne. Au sommaire:
Spectroscopie d'absorption ultraviolette et
visible
http://www.ensa-agadir.ac.ma/gpee/index.php?page=download
Gilles TIXIER Mardi 10. Février 2009 9:46
Mes collègues de PHYLOGÈNE ont innové :
OpGen identifie les microorganismes sur cartes optiques
La technologie OpGen (Phylogene) permet d¹établir une cartographie complète du génome des microorganismes.
Son automatisation pourrait bientôt réduire le délai d¹analyse de trois semaines à deux heures.
http://www.editionsduboisbaudry.fr/bi/article.php?action=pa&id=44063
Hubert BAZIN Mercredi 11. Février 2009 7:33
Superbe résultat de la recherche ...
Je serais *très* intéressé par comprendre comment on peut, en moins de 2 heures "allonger l'ADN, le couper (...), le révéler par fluorescence puis le mesurer". J'avais cru comprendre qu'hors du séquencage, il n'y avait point de salut, que la taille des fragments d'ADN n'était qu'un facteur permettant de se "rassurer" quant au résultat de la manip, mais jamais d'identifier un gène ?
Auriez-vous des infos plus scientifiques sur la méthodologie utilisée ? On ne fait plus d'amplification PCR ?, c'est bien ça ?
Quant au blast sur GeneBank - ou à toute base de données équivalente - comment peut-on valider la qualité des séquences qui y sont stockées ? Ce n'est pas une question en l'air : j'ai abordé ce sujet avec un certain nombre de chercheurs en biologie moléculaire, et ils n'ont pas de réponse satisfaisante (ou plutôt si : ils ont une réponse, qui ne satisfait presonne)
Nicolas BUJAUD Jeudi 12. Février 2009 9:12
Je réagis à ce type d'annonce en élargissant le sujet. Depuis 10 ans, on voit un nombre important d'intervenants (essentiellement des industriels du diagnostic humain américain) investir dans la biologie moléculaire en général, la PCR en particulier. Actuellement, si je regarde sur le site de l'Afnor, il y a pas mal de kit PCR validé pour la recherche de pathogène dans les aliments. Aussi, j'aimerai savoir, parmi les colistiers de cette liste, combien d'industries agro sont actuellement équipées pour la recherche de bactéries par PCR en routine? Est-ce que ce genre de technique apporte vraiment une réponse intéressante quant au délai, la précision, le coût, la mise en oeuvre, les faux positifs et, plus difficile, les faux négatifs?
Après 10 années de lobby important en Europe en général et en France en particulier, peut-on commencer à tirer des conclusions sur l'apport de cette technologie annoncée comme pouvant, en quelques heures simplement, trouver 1 pathogène dans n'importe laquelle des matrices.
Gilles TIXIER Jeudi 12. Février 2009 14:03
Je retransmets ici la réponse de Gilbert SKORSKI ( PHYLOGÈNE) aux message de Hubert BAZIN et de Nicolas BUJAUD
à noter que deux documents sont disponibles en les demandant à Gilbert SKORSKI :
* Optical maping (diaporama )
* Optical maps distinguish individual strains of Escherichia coli O157 : H7 (publication)
*
Cordialement
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Gilles TIXIER - Amplitude - Consultant Qualité & Hygiène (HACCP), en région PACA
Adél : amplitude@wanadoo.fr
Membre du réseau CASE : <http://www.reseau-case.com/gti/amplitude/>
Partenaire de l´Association " 4L Co-Filles " : <http://www.4lcofilles.com>
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Cette nouvelle technologie des Cartes Optiques du Génome est très performante, raison pour laquelle l´industrie des probiotiques s´y intéresse. Elle a permis :
- de tracer les différences entre souches produisant différents arômes, et de localiser quelle partie est concernée,
- d´obtenir une signature unique qui a servi de preuve à la Protection Industrielle
- de mettre en évidence une partie du génome spécifique permettant de monter des RT PCR différenciantes
- de connaître l´historique d´une souche, incluant les infections phagiques et les insertions qui en découlent
La Carte Optique du génome permet d´obtenir une carte de restriction au niveau de l´ADN d´un génome bactérien ou fongique entier présenté sous forme d´un code barre. Il est ensuite aisé de :
- Comparer les Cartes Optiques de souches entre elles et ainsi identifier les insertions, délétions et translocations pour monter des PCRs identifiantes, ou pour comprendre les différences phénotypiques, par exemple les différences entre souches de probiotiques. Des résultats étonnants ont été obtenus pouvant expliquer pourquoi une souche infectée par un phage n´exprimait plus un arôme.
- Identifier les organismes inconnus dans un mix de culture ou un produit vivant. Avec les techniques actuelles, on ne trouve que ce qu´on recherche, la technique des Cartes Optiques est descriptive
-Identifier les gènes présents dans une souche en comparaison avec une souche de référence séquencée. Le logiciel Mapviewer permet de constituer in silico la Carte Optique d´une souche séquencée et de comparer ainsi sa souche à celle-ci pour en identifier les parties identiques.
- Faire ou vérifier le montage d´un séquençage à partir des contigs, y compris sur des séquençages eucaryotes.
C´est une technologie qui est bien plus discriminante et reproductible que ce qui est utilisé aujourd´hui comme l´électrophorèse en champ pulsé, la repPCR, l´AFLP par le nombre de marqueurs bien plus élevé (minimum de 200 marqueurs sur un génome pour une 20aine en ECP) et de plus elle fonctionne sur des mélanges.
Pour plus d´information ou une démo dans MapViewer sous webex.
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Le facteur limitant à la PCR dans les usines reste encore à mon avis l´extraction de l´ADN
En ce qui concerne les Optical Maps, cette techno est descriptive des ADNs présents : on ne va pas chercher quelque chose de suspecté, on décrit ce qu´il y a.
Deux heures est l´objectif des machines, une fois la bactérie obtenue.
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Bien cordialement
Gilbert Skorski
<g.skorski@phylogene.com>
PHYLOGENE
62 RN 113 - 30620 Bernis
Ph: 33 4 66 04 77 99 Fax: 33 4 66 04 77 97
Mob: 33 6 76 21 97 54
JEUDI
18 JUIN 2009
OIE
- Numéro plurithématique Revue scientifique et
technique 27 (3),
2008
http://www.oie.int/boutique/index.php?page=ficprod&id_produit=116&fichrech=1&lang=fr
Cartes
de contrôle utilisant des sérums de contrôle pour
déceler les erreurs
systématiques avec l’ELISA
indirect (…)
Solutions
aux problèmes posés par l’utilisation de
l’amplification en chaîne
par polymérase comme
test unique de diagnostic chez les animaux aquatiques
MARDI
13 OCTOBRE 2009
FOOD
SAFETY INSIDER: Rapid Solutions in Microbiology
Real-Time PCR Test
Speeds Time to
Results
http://www.foodsafetymagazine.com/article.asp?id=3391&sub=sub1
JEUDI 20 MAI 2010
Journal of Chromatography A - MAI 2010 - Quantification of
endocrine disruptors and pesticides in water by gas
chromatography-tandem mass spectrometry. Method validation using
weighted linear regression schemes
http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6TG8-5017HKX-7&_user=8962519&_coverDate=05%2F06%2F2010&_rdoc=1&_fmt=high&_orig=search&_sort=d&_docanchor=&view=c&_acct=C000050221&_version=1&_urlVersion=0&_userid=8962519&md5=9152826b63d015d40a46d43982119b69
a
Instituto Nacional de Saúde Dr. Ricardo Jorge. Porto,
Portugal
b Requimte, Faculdade de Farmácia, Universidade do
Porto. Porto, Portugal
c Faculdade de Ciências da Nutrição
e Alimentação, Universidade do Porto. Porto, Portugal
d
Requimte, Instituto Superior de Engenharia do Porto. Porto,
Portugal
e Requimte, Faculdade de Ciências, Universidade do
Porto. Porto, Portugal
f Requimte, Universidade do Porto. Porto,
Portugal 1700
MERCREDI 09 JUIN 2010
LAVOISIER - SEPT 2010 -
Molecular detection of human viral
pathogens
http://www.lavoisier.fr/notice/frLWOX23RAS6W2KR.html
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